伯乐pcr如何查导出ct值定性

荧光定量PCR(qPCR)使用和数据分析（伯乐篇）

空谷临风

病毒进化

该文章仅适合伯乐（BIO-RAD）仪器的qPCR实验及数据分析

荧光定量（qPCR）程序运行

创建一个新的程序，或者选已经创建好的文件，下一步

选择正确的板子类型，下一步

直接点击Start Run

数据分析

1 使用伯乐的CFX Maestro软件直接查看

选择Gene Expression——Plate Setup——view plate

选中PCR孔，

Target Names是组名填基因的名字或者是管家/内参基因（Actin）

Sample Names填样品的名称

关掉表格，选择是

选择Actin作为内参基因，点击OK

就可以用软件查看基因表达量了。

2 将运行的结果导出，用GraphPad展示

将下边这部分数据导入到GraphPad

选择Mean &SEM

将Expression的数据填入Mean列，将Corrected Expression SEM填入SEM列

点击表格对应的Graphs。

同一个实验平行三组可以用sem。根据查询相关公开信息显示，同一个实验，也可以使用统计学方法sem（结构方程模型）来分析并进行比较。在分析sem时，可以对比三组的结果，从而更好的掌握整个实验的结果。

SEM是

扫描电子显微镜

，主要用于电子显微成像，接配电子显微分析附件，可做相应的特征分析，

最常用的是聚焦

电子束

和样品相互作用区发射出的元素特征

X-射线

，可用EDS或者WDS进行探测分析，获得微区（作用区）元素成分信息，而EDS或者WDS这类电子显微分析附件却来源于EPMA。

SEM就是一个电子显微分析平台，分析附件可根据用户需要来选配，有需要这个的，有需要那个的，因此

扫描电镜

结构种类具有多样性，从tiny、small、little

style，to

middle、large、huge

style.

就EDS或WDS分析技术来讲，在SEM上使用，基本上使用无

标样

分析，获得很粗糙的

半定量

结果。

而EPMA在SEM商品化10年前，就已经开始实用了，其主要目的，就是要精确获得微米尺度晶粒或颗粒的成分信息.

主要分析手段是WDS，一般配置4个WDS，基于此，EPMA结构比较单一，各品牌型号结构差距不大。EMPA追求电子显微分析结果精准，因此

电子光学

设计不追求高分辨，电子显微分析对汇聚束的要求相匹配即可。

早期EPMA成像手段主要采用同轴

光学显微镜

，然后移动样品台或移动汇聚电子束，找到感兴趣区，当前依然保留同轴光镜，用来校准WD。EMPA对电子光学系统工作条件的稳定性要求超过SEM很多很多，控制系统增加了一些

负反馈

机制，确保分析条件和标样分析保持很小的误差。

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